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什么是流式细胞仪?

来源:www.ahlulin.com   时间:2023-10-07 02:50   点击:243  编辑:admin   手机版

一、什么是流式细胞仪?

流式细胞仪可同时进行多参数测量,信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号。测量是在测量区进行的,所谓测量区就是照射激光束和喷出喷孔的液流束垂直相交点。液流中央的单个细胞通过测量区时,受到激光照射会向立体角为2π的整个空间散射光线,散射光的波长和入射光的波长相同。散射光的强度及其空间分布与细胞的大小、形态、质膜和细胞内部结构密切相关,因为这些生物学参数又和细胞对光线的反射、折射等光学特性有关。未遭受任何损坏的细胞对光线都具有特征性的散射,因此可利用不同的散射光信号对不经染色活细胞进行分析和分选。经过固定的和染色处理的细胞由于光学性质的改变,其散射光信号当然不同于活细胞。散射光不仅与作为散射中心的细胞的参数相关,还跟散射角、及收集散射光线的立体角等非生物因素有关。

‍‍流式细胞仪(Flowcytometer)是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总蛋白量等指标,而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是说,它的细节分辨率为零。流式细胞仪主要由四部分组成。它们是:流动室和液流系统;激光源和光学系统;光电管和检测系统;计算机和分析系统。流动室和液流系统流动室由样品管、鞘液管和喷嘴等组成,常用光学玻璃、石英等透明、稳定的材料制作。

设计和制作均很精细,是液流系统的心脏。样品管贮放样品,单个细胞悬液在液流压力作用下从样品管射出;鞘液由鞘液管从四周流向喷孔,包围在样品外周后从喷嘴射出。为了保证液流是稳液,一般限制液流速度υ<10m/s。由于鞘液的作用,被检测细胞被限制在液流的轴线上。流动室上装有压电晶体,受到振荡信号可发生振动。流式细胞仪的分选功能是由细胞分选器来完成的。总的过程是:由喷嘴射出的液柱被分割成一连串的小水滴,根据选定的某个参数由逻辑电路判明是否将被分选,而后由充电电路对选定细胞液滴充电,带电液滴携带细胞通过静电场而发生偏转,落入收集器中;其它液体被当作废液抽吸掉,某些类型的仪器也有采用捕获管来进行分选的。

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稳定的小液滴是由流动室上的压电晶体在几十KHz的电信号作用下发生振动而迫使液流均匀断裂而形成的。一般液滴间距约数百μm。实验经验公式f=v/4.5d给出形成稳定水滴的振荡信号频率。其中v是液流速度,d为喷孔直径。由此可知使用不同孔径的喷孔及改变液流速度,可能会改变分选效果。使分选的含细胞液滴在静电场中的偏转是由充电电路和偏转板共同完成的。充电电压一般选+150V,或-150V;偏转板间的电位差为数千伏。充电电路中的充电脉冲发生器是由逻辑电路控制的,因此从参数测定经逻辑选择再到脉冲充电需要一段延迟时间,一般为数十ms。精确测定延迟时间是决定分选质量的关键,仪器多采用移位寄存器数字电路来产生延迟。可根据具体要求予以适当调整。

二、流式细胞仪分选细胞需要多大的细胞量

这个完全取决于你样本的质量,阳性细胞的比率和你对下一步实验的要求。

举几个例子:

96孔盘单个细胞分选,目标细胞只要96个。如果阳性率是50%,那几百个细胞就可以了,如果阳性率不到1%,那几万个细胞也不一定能选出来。

或者,阳性率有20-30%,但是下游实验需要几百万个细胞,那你需要几千万的细胞才可以满足。

三、实验室设备分类目录

也可以参考一下如下分类:

生化仪器

离心机 培养箱 气候箱 摇床 电泳设备 恒温设备 干燥设备 振荡器 匀浆/混合器 搅拌器 制冷设备 各类泵 其他

净化纯水设备

生物安全柜 净化工作台 超声波清洗设备 纯水机 蒸馏水器 灭菌器 过滤器 洁净室 净化配套设备

分析仪器

电化学仪 紫外分析仪 水质分析仪 气体分析仪 热分析仪 光谱仪 色谱仪 其他

实验室配套设备

理化板 水龙头 气体考克 水槽/杯槽 滴水架 洗眼器 抽气罩 升降凳 附件

光学仪器

显微镜 光学投影仪 光学元配件 其他

实验室成套设备

实验台 储存柜 通排气设备 成套设备

计量仪器

天平 衡器 量具 其他计量设备

实验室耗材

移液器 玻璃仪器 化学药品试剂 其他

检测仪器

材料检测仪器 石油检测仪器 环保检测仪器 其他检测仪器

行业专用仪器设备

试验箱 试验机 实验电炉 研磨混合设备 数控车床 土工仪器 其他专用仪器

教学仪器

物理实验仪器 化工实验装置 生物实验仪器 单片机 计算机实验装置 自动化控制实验装置 实验仪 实验箱 实验软件 半导体冷阱 普教教学仪器 其他教学仪器

电子电工仪器

万用表 示波器 信号发生器 扫频仪 逻辑分析仪 计数器 频率计 电源 电子元器件 各类表 防雷产品 其他电子电工仪器

试验设备

试验机 试验箱 试验室 其他试验设备

实验室常规仪器

・离心机

・PCR仪

・核酸/蛋白定量 分光光度计

・酶标仪 洗板机

・纯水仪

・干燥烘箱

・培养箱

・混匀器 摇床 涡旋 磁力搅拌

・恒温器 水浴(制冷/恒温)

・冻干 真空浓缩系统

・杂交炉

・紫外交联仪 紫外观测

・超低温冰箱 液氮罐

・其他实验室常用工具

・净化 安全 消毒

成像/图像分析系统

・多功能成像分析系统

・红外激光成像系统

・显微数字图像处理分析

・图形采集/分析软件

・显微镜数码成像配件

电泳产品

・水平电泳

・垂直电泳

・等电聚焦系统

・电转移装置/半干转移

・电泳电源

・冷却器/干胶/其他

移液器/液体分装

・手动移液器/电动移液器

・移液管移液器

・手动分液器/电动分液器

・瓶口分液器

・数字滴定仪

分析设备

・液相色谱

・气相色谱

・光谱

生产设备

・上游设备

・下游设备

生物芯片系统

・Affymetrix基因芯片系统

・芯片点样仪

・芯片杂交仪

・芯片扫描仪

・液体芯片系统

・芯片分析软件

・芯片消耗品

基因组研究工具

・DNA测序仪

・遗传分析系统 染色体核型分析

・SNP分析

・DNA合成仪

蛋白质组研究工具

・2D电泳

・蛋白凝胶成像

・蛋白质点取样/spot picking

・蛋白质组工作站

・蛋白质组分析软件

・质谱

细胞学和免疫学研究

・细胞培养设备 发酵罐

・程序式冷冻/低温储存

・显微镜 显微操作 显微切割

・电转移仪 电融合仪

・细胞分选 细胞收集

・流式细胞仪

・FISH变性/杂交/样品处理

・细胞破碎/组织细胞分离

・全自动免疫组化切片染色分析

・细胞玻片染色/细胞离片机

・粒度分析和细胞计数

自动化和高通量实验设备

・全自动液体分装系统

・全自动核酸和蛋白纯化系统

・全自动免疫组化切片染色分析

・全自动PCR操作工作站

诊断试纸条生产设备

・喷点平台

・条带粘贴

・切条机

・读条系统

・试纸条检测仪

净化系统工程

电柜铰链 手术室吊塔 ICU病房

ZKW系列组合式空调机组 彩钢夹芯板 层流净化设备

传递窗 防火阀 风阀

风淋室 过滤设备 货架

夹胶玻璃 洁净手术室 紧急洗眼器

净化门 静脉配置中心 散流器

杀菌设备 实验器皿柜 实验室设计

实验台 水槽 水龙头

消音弯头 压差计

医疗科研仪器

B型超声波诊断仪 安全柜气幕检测仪 保存箱

彩色经颅多普勒血流仪 超低温冰箱 超净工作台

超声波清洗机 大气测量采样架 氮气吹扫仪

低温连接仪 电脑仿生肝病治疗仪 电子程控消解仪

动静洗三合一染毒柜 二氧化碳激光机 二氧化碳培养箱

二氧化碳细胞培养箱 法医DNA实验室管理系统 风湿理疗仪

福尔马林熏蒸灭菌器 妇科专用微波治疗仪 隔水式培养箱

核酸/蛋白凝胶图像分析管理系统 恒温恒湿箱 恒温金属浴

恒温培养箱 恒温循环水槽 恒温仪

红外光谱仪 红外线灭菌器 呼吸机

呼吸机 化学免疫分析系统 毁形机

基因扩增仪 激光血球计数仪 急救机

技工类(牙科) 加热设备 浸入式恒温器

净气型储药柜 冷冻干燥系列 离心机

麻醉机 酶标仪 酶联免疫分析仪器

霉菌培养箱 灭菌柜 灭菌器

灭菌箱 内窥镜洁净存储器 内窥镜消毒清洗机

尿液分析仪 凝血分析仪 气溶胶吸附器

全智能人工气候植物箱 全自动吸入毒性实验装置 全自动血液分析仪

人工气候箱 生化分析仪 生化培养箱

生物安全柜 生物安全柜搁手架 生物显微镜系列

碳酸氢氨中和器 糖尿病分析仪 通风柜

微生物鉴定/药敏分析系统 吸氧仪 洗板机

系列显微图像分析管理系统 消毒箱 消化高压罐

血球分析仪 血液冷藏箱 牙科手术器械

牙科综合治疗仪 厌氧培养箱 药品冷藏箱

医疗废弃物焚烧净化系统 医用空气压缩机 婴儿蓝光床

荧光定量PCR分析系统 荧光分析系统 荧光检测仪

匀浆机 振荡培养箱 振动排痰机

治疗仪 智能恒温循环水器 紫外投射分析仪

实验生物制品

(安宁包)厌氧产气袋 病毒性疫苗 二氧化碳培养产气剂

混合制剂疫苗 抗毒素制剂 类毒素疫苗

免疫调节制剂 生化分析仪用试剂 微好氧培养产气剂

细菌性疫苗 细菌性制剂 细菌衍生物类

血液、免疫类 血液制剂 医用生化试剂

诊断试剂盒类 诊断血清类

实验耗材配件

不锈钢制品 定性滤纸 盒类

夹类 架类 漏斗

漏斗架 酶标板 灭菌包装袋

皿类 瓶类 钳类

十字夹 实验用板类 实验用杯

实验用灯类 实验用塞 试管

试管刷 手术拉钩 台类

网类 针剂类

单管发光检测仪,Nabi紫外/可见光超微量分光光度计,微孔板发光检测仪

CR单管、八联管、96孔板、384孔板

不同用途的实验室需要不同材质的设备,要选择与实验室相匹配的设备,辽宁浩洁净化设备制造有限公司是一家专业研发净化工程及配套产品的综合公司。本公司主要服务于医院手术室、供应室、检验科;医药车间、无尘电子食品车间,以及各种实验室配套净化产品。

公司拥有专业技术研发团队,结合现代化数控设备,以打造东三省专业净化产品为宗旨,努力构建净化产品一站式采购、一条龙服务为愿景,更好的回馈新老客户。公司产品遍布东北及周边地区,深受客户喜爱。

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